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C1q ELISA​

更新时间:2024-02-01

简要描述:

C1q ELISA​样品收集、处理及保存方法:血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。检测对象:人血清/血浆及相关液体实验方法:双抗原夹心法进行测

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C1q ELISA

C1q ELISA样品收集、处理及保存方法:血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。检测对象:人血清/血浆及相关液体实验方法:双抗原夹心法进行测

ELISA试剂分类: RD试剂盒,GBD试剂盒,IBL试剂盒

2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
 3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
 4、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。
不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

常用生化试剂作用:

1、蛋白酶K:能水解消化蛋白质,特别是与DNA结合的组蛋白,在尿素和SDS中稳定。一般工作浓度是50—100μg/ml,推荐反应缓冲液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。

2、SDS:十二烷基硫酸钠,溶解细胞膜上的脂类与蛋白质,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜,并解离细胞中的核蛋白,SDS 还能与蛋白质结合而沉淀。

3、IPTG:异丙基-β-D-硫代半乳糖苷, 常用于蓝白斑筛选及IPTG诱导的细菌内的蛋白表达等。IPTG和乳糖的结构相似,所以它和乳糖一样,可以与乳糖操纵元的阻遏蛋白结合,

使阻遏蛋白的空间构像变化,四聚体解聚成单体,失去与操纵子特异性结合的能力,从而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以转录合成利用乳糖的酶类。与乳糖不同的是,

IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常与X-GAL一起用于蓝白斑筛选。作用*的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定。

4、X-gal:5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,是IPTG的显色试剂,在IPTG的催化下显蓝色。常跟IPTG一起用与蓝白斑筛选。

5、G418:一种抗生素,对几乎所有的细胞都有毒性,是稳定转染zui常用的选择试剂。当neo基因被整合进真核细胞基因组合适的地方

6、DMSO:二甲基亚砜。实验室常用于作液体层析溶剂,同时用作测试物质紫外消光值上时用作参照物。能溶于所有烷烃和烯烃。

7、曲拉通X-100:TritonX-100,用的细胞裂解液成分之一,在保护蛋白活性方面有一定作用, 能力介于NP40和SDS之间,偏向于NP40。

8、NP-40:很温和的去垢剂,1%浓度的基本可以破坏掉胞膜,而对核膜破坏的作用弱,结合特定的buffer可以获得胞浆蛋白。

9、BSA:牛血清白蛋白, 主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。在动物细胞无血清培养中,添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。常用于蛋白定量中的内参和抗体稀释液。

10、甲酰胺: 甲酰胺被用作凝胶电泳中RNA的稳定剂,也用于稳定毛细管电泳中的变性单股DNA。



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