RG2 [D74]大鼠胶质瘤细胞源自大鼠胶质瘤组织，呈星形胶质样贴壁生长，具强侵袭性与致瘤性，是胶质瘤发病机制、侵袭转移及抗肿瘤药物筛选的常用模型。

RG2 [D74]大鼠胶质瘤细胞

RG2 [D74]大鼠胶质瘤细胞是脑胶质瘤基础研究与抗肿瘤策略研发的经典模型，源自化学致癌物诱导的大鼠脑胶质瘤组织，经原代分离、体外克隆筛选及体内致瘤性验证建立。作为保留高级别胶质瘤核心恶性特征的细胞系，它既解决了原代胶质瘤细胞体外培养难、传代不稳定的痛点，又能精准复现脑胶质瘤 “浸润性生长、血脑屏障穿透、颅内致瘤" 的临床病理特征，成为研究脑胶质瘤发病机制、侵袭转移规律及跨血脑屏障药物筛选的理想工具，广泛应用于神经肿瘤学基础研究、脑胶质瘤治疗方案优化及新型药物研发等领域。

从生物学特性来看，RG2 [D74] 细胞呈现 “高级别胶质瘤恶性属性 + 脑肿瘤特异性特征" 的双重优势。光学显微镜下，细胞具典型星形胶质样形态：胞体呈不规则多边形，胞质丰富且伸出多条长短不一的梭形突起，突起相互交织形成网状结构（模拟体内胶质瘤细胞浸润脑组织的形态特征）；胞质内可见细小颗粒（为肿瘤细胞代谢相关细胞器），部分细胞因增殖活跃出现多核或巨核现象；细胞核呈圆形或椭圆形，位于胞体中央或偏位，染色质分布不均，核仁明显且数量增多（多为 2-3 个），核异型性程度符合 WHO IV 级胶质瘤（胶质母细胞瘤）的病理特征，wan美贴合临床高级别胶质瘤的形态表现。功能层面，其核心价值在于三大关键特性：一是强浸润性生长能力，通过 Transwell 侵袭实验可观察到细胞能高效穿透人工基底膜（穿膜细胞数较低级别胶质瘤细胞系高 60%-80%），且在 3D 基质胶培养中可形成分支状浸润结构，模拟体内胶质瘤沿神经纤维、血管间隙浸润生长的模式；二是稳定颅内致瘤性，将细胞接种至大鼠颅内后，可在 2-3 周内形成与临床胶质瘤形态相似的肿瘤，且肿瘤组织会侵犯周围脑实质（如皮质、海马区），并伴随血管增生、坏死等典型病理改变，为体内药效评估提供可靠模型；三是脑肿瘤特异性标志物表达，可检测到胶质纤维酸性蛋白（GFAP，星形胶质细胞来源标志物）、波形蛋白（Vimentin，间质侵袭相关标志物）及基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9，促侵袭酶类）的高表达，通过免疫组化或 Western blot 可清晰验证，为细胞身份鉴定与功能研究提供依据。生长特性上，细胞为贴壁依赖性生长，最适培养条件为 37℃、5% CO₂恒温恒湿环境，pH 维持在 7.2-7.4；增殖速率较快，倍增时间约为 36-48 小时，对数生长期细胞密度可达 3×10⁵-5×10⁵个 /cm²，无明显接触抑制特性，当细胞融合度达到 80% 时需及时传代，避免过度堆积导致侵袭能力下降。

在培养操作与质量控制层面，RG2 [D74] 细胞的培养需重点关注 “维持浸润性与致瘤性"，避免因培养条件不当导致恶性表型漂移。培养基选择上，常规使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 高糖培养基，并添加 1% 非必需氨基酸混合物 —— 非必需氨基酸可补充肿瘤细胞高代谢所需底物，维持其活跃增殖与侵袭功能；血清需经过支原体检测与神经肿瘤细胞兼容性验证，确保无有害微生物且不含抑制肿瘤侵袭的外源因子。培养操作时，可使用普通塑料培养皿（细胞贴壁能力较强），但需避免频繁更换培养环境或剧烈晃动，减少机械刺激对细胞突起结构与侵袭能力的影响；传代流程需精准控制：先用无菌 PBS 缓冲液轻柔冲洗细胞表面 2-3 次，去除残留培养基与代谢废物，加入 0.25% 含 EDTA 的细胞消化液，37℃孵育 3-4 分钟，待显微镜下观察到细胞胞体收缩、突起回缩时，立即加入含血清的培养基终止消化，用移液器轻柔吹打（力度以不打断细胞突起为度）形成单细胞悬液，按 1:4-1:6 的比例接种至新培养皿，24 小时内即可完成贴壁与突起再延伸。质量控制需增加 “恶性表型验证" 维度：通过 Transwell 侵袭实验检测穿膜细胞数（每视野需≥50 个，确保侵袭能力稳定）；通过免疫细胞化学染色验证 GFAP、Vimentin 阳性表达率（均需≥75%），确认细胞胶质瘤表型；通过台盼蓝染色确保细胞活力≥90%，避免活力下降影响增殖与侵袭功能检测结果，全fang位保障细胞符合实验需求。

在科研应用领域，RG2 [D74] 细胞凭借 “临床病理特征贴合 + 体内外功能稳定" 的优势，在脑胶质瘤研究中发挥不可替代的作用。胶质瘤侵袭转移机制研究是其核心应用场景 —— 科研人员可通过该细胞解析胶质瘤浸润脑组织的分子机制：例如通过基因沉默技术抑制 MMP-9 或表皮生长因子受体（EGFR）的表达，观察细胞侵袭能力变化及与神经细胞、血管内皮细胞的相互作用，明确这些分子在胶质瘤沿神经纤维、血管间隙侵袭中的关键作用；同时，研究细胞分泌的细胞因子（如 TGF-β、IL-6）对脑微环境的改造作用，可为理解胶质瘤免疫逃逸与侵袭的关联提供实验依据。跨血脑屏障药物筛选方面，RG2 [D74] 细胞是评估药物脑靶向性的理想工具 —— 通过构建体外血脑屏障模型（如与脑微血管内皮细胞共培养），观察候选药物穿透屏障后对 RG2 [D74] 细胞的杀伤效果，筛选兼具跨屏障能力与抗肿瘤活性的药物；例如检测脂质体包裹的hua疗药物能否高效穿透模拟屏障，且对细胞增殖的抑制率≥60%，为脑胶质瘤靶向给药系统研发提供数据支撑。体内药效评估与治疗策略验证中，细胞的颅内致瘤性特征凸显价值 —— 将细胞接种至大鼠颅内构建原位胶质瘤模型后，可通过尾静脉注射、局部给药等方式测试药物疗效，观察肿瘤体积变化（通过 MRI 成像）、大鼠生存期延长情况及肿瘤组织病理改变，验证治疗方案的有效性；例如评估免疫检查点抑制剂（如 PD-1 抗体）联合hua疗药物对原位肿瘤的抑制效果，为脑胶质瘤免疫联合治疗提供体内实验依据。此外，细胞还可用于胶质瘤干细胞研究，通过流式细胞术分选 CD133⁺/Nestin⁺干细胞样亚群，研究其自我更新、耐药性特征，为针对胶质瘤干细胞的治疗策略研发提供基础。

不过，使用 RG2 [D74] 细胞需注意其局限性。该细胞系源自化学诱导胶质瘤，仅能模拟特定诱因（如化学致癌物）导致的脑胶质瘤，无法wan全代表临床中遗传突变驱动（如 IDH 突变、EGFR 扩增）的胶质瘤亚型，研究不同分子亚型时需搭配对应细胞系（如 U87MG 人胶质瘤细胞）补充验证。细胞的颅内致瘤模型依赖免疫功能正常的大鼠，与临床胶质瘤患者的免疫抑制状态存在差异，评估免yi治疗效果时需结合免疫缺陷小鼠模型进一步验证。此外，长期传代（超过 40 代）可能导致细胞侵袭能力下降或致瘤性减弱，需定期冻存早期传代细胞（如 P5-P10 代），并在实验前通过体外侵袭实验与体内致瘤性验证，确保细胞恶性特征稳定，避免因表型漂移影响实验结果的可靠性与重复性。