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人脐静脉细胞融合细胞
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人脐静脉细胞融合细胞由人脐静脉细胞与其他细胞融合形成,兼具亲本细胞特性,可用于研究细胞通讯、基因表达调控,在疫苗研发、疾病机制探索中是重要实验材料。

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更新时间:2025-10-13

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人脐静脉细胞融合细胞

人脐静脉细胞融合细胞是通过细胞融合技术,将人脐静脉来源细胞(多为脐静脉内皮细胞,HUVECs)与其他类型细胞(如免疫细胞、肿瘤细胞、干细胞等)进行诱导融合,形成的兼具两种亲本细胞核心生物学特性的新型杂交细胞。细胞融合技术的核心是打破细胞膜的天然屏障,促使不同来源细胞的细胞质与细胞核相互融合,最终形成单核或多核的杂交细胞;常用诱导方式包括化学诱导(如聚乙二醇 PEG)、物理诱导(如电融合)与生物诱导(如病毒介导,如仙台病毒),其中电融合因操作简便、融合效率高、对细胞损伤小,成为构建这类融合细胞的主流方法。这类融合细胞既保留了人脐静脉内皮细胞的血管相关功能特征(如血管生成、物质转运),又整合了另一亲本细胞的特异性功能(如免疫识别、肿瘤靶向、干细胞分化潜能),在细胞生物学研究、疾病机制解析及临床转化应用中展现出独特优势,是近年来生物医学领域的重要研究工具。

从细胞来源与融合原理来看,人脐静脉内皮细胞是融合的核心 “亲本之一",其优势在于来源丰富(取自新生儿脐带,伦理争议小)、增殖能力强、功能稳定,且高表达血管内皮特异性标志物(如 CD31、血管内皮生长因子受体 VEGFR2),具备完整的血管内皮细胞功能(如形成血管样结构、分泌血管活性物质)。另一亲本细胞的选择则根据研究目标而定:若聚焦免疫相关研究,常选择免疫细胞(如 T 淋巴细胞、树突状细胞),使融合细胞兼具内皮细胞的血管定位能力与免疫细胞的抗原呈递、免疫杀伤功能;若针对肿瘤研究,多选择肿瘤细胞(如肺癌细胞、肝癌细胞),构建的融合细胞可模拟肿瘤血管微环境中的细胞相互作用,用于研究肿瘤血管生成机制;若侧重再生医学研究,则会选择干细胞(如间充质干细胞、胚胎干细胞),让融合细胞同时拥有内皮细胞的血管构建能力与干细胞的多向分化潜能。细胞融合的关键在于诱导后需通过筛选获得稳定的杂交细胞 —— 由于细胞融合具有随机性,融合后会产生未融合亲本细胞、同型融合细胞(如脐静脉内皮细胞 - 脐静脉内皮细胞融合)与异型融合细胞(目标杂交细胞),需利用选择培养基(如 HAT 培养基,筛选含次黄piao呤 - 鸟piao呤磷酸核糖基转移酶 HGPRT 或胸腺嘧啶激酶 TK 的杂交细胞)或流式细胞术(基于亲本细胞特异性标志物分选),最终获得纯度达 90% 以上的目标融合细胞。

在核心生物学特性方面,这类融合细胞的显著优势是 “功能互补性" 与 “表型稳定性",具体体现在三个维度。一是血管相关功能与特异性功能的协同 —— 以脐静脉内皮细胞 - 树突状细胞融合为例,融合细胞既保留了内皮细胞的血管黏附能力(通过 CD31 与血管内皮黏附分子 VCAM-1 介导,可靶向结合血管壁),又具备树突状细胞的抗原呈递功能(表达 MHCⅡ 类分子与共刺激分子 CD80/CD86,可激活 T 淋巴细胞),能在血管局部高效激活免疫反应,为肿瘤免yi治疗提供新方向;二是基因表达的协同调控 —— 融合细胞的细胞核融合后,亲本细胞的基因组会发生相互作用,可能激活原本沉默的功能基因,或增强特定基因的表达,例如脐静脉内皮细胞 - 间充质干细胞融合后,间充质干细胞的血管生成相关基因(如 VEGF、bFGF)表达会被内皮细胞的调控信号增强,显著提升融合细胞的血管构建能力;三是表型的长期稳定性 —— 通过克隆化培养筛选出的单克隆融合细胞,可在体外长期传代(通常可传 20-30 代)且保持稳定的双亲本功能特性,避免因传代导致的功能退化,这为长期实验研究与临床应用奠定了基础。

体外构建与培养条件方面,这类融合细胞的培养需兼顾两种亲本细胞的生长需求,重点维持其融合特性。构建过程分为三步:第一步是亲本细胞准备,脐静脉内皮细胞需在含内皮细胞生长添加剂(ECGS,10μg/mL)与肝素(50U/mL)的 DMEM/F12 培养基中培养至对数生长期,另一亲本细胞(如树突状细胞)则需在对应专用培养基中培养至功能成熟;第二步是细胞融合,采用电融合法时,将两种细胞按 1:1 比例混合,调整细胞浓度至 1×10⁶个 /mL,在电融合仪中施加适宜电场强度(100-200V/cm)与脉冲时间(10-50μs),诱导细胞膜融合;第三步是筛选纯化,融合后将细胞接种于选择培养基(如 HAT 培养基),培养 7-10 天,淘汰未融合细胞与同型融合细胞,再通过免疫荧光染色(检测双亲本标志物,如 CD31 与 CD86)验证融合细胞纯度,最终获得目标细胞。培养过程中,基础培养基需以脐静脉内皮细胞培养基为基础,添加另一亲本细胞生长所需的关键因子(如培养免疫细胞融合细胞需添加 IL-2,培养干细胞融合细胞需添加 bFGF);培养环境控制在 37℃恒温、5% CO₂浓度,培养基 pH 稳定在 7.2-7.4,湿度保持 50%-60%,每 2-3 天更换一次培养基,当细胞融合度达 70%-80% 时进行传代,避免细胞过度密集影响功能。

在科研与临床应用价值上,这类融合细胞的应用场景广泛且潜力显著。在基础研究领域,可用于探索细胞间信号通讯机制 —— 通过分析融合细胞中亲本细胞信号通路的相互作用(如内皮细胞 VEGF 通路与肿瘤细胞 PI3K 通路的交叉调控),揭示细胞微环境中不同细胞类型的协作或拮抗机制;还可用于基因功能研究,将特定基因导入融合细胞,观察其对双亲本功能的影响,为基因功能验证提供独特模型。在疾病机制研究中,肿瘤相关融合细胞(如脐静脉内皮细胞 - 肿瘤细胞)可模拟肿瘤血管生成过程,用于筛选抑制肿瘤血管生成的药物靶点(如 VEGFR2、MMP-9);感染性疾病研究中,脐静脉内皮细胞 - 免疫细胞融合细胞可模拟病原体(如新guan病毒、乙肝病毒)感染血管内皮后的免疫应答过程,助力解析疾病进展机制。在临床转化领域,其应用集中在三个方向:一是疫苗研发,将脐静脉内皮细胞与病原体抗原呈递细胞融合,构建的融合细胞可靶向血管系统激活全身免疫反应,提升疫苗的免疫原性与靶向性;二是肿瘤免yi治疗,脐静脉内皮细胞 - 免疫细胞融合细胞可作为 “靶向免疫载体",既通过内皮细胞特性定位肿瘤血管,又通过免疫细胞功能杀伤肿瘤细胞,目前已有相关动物实验证实其对黑色素瘤、肺癌的治疗效果;三是再生医学,脐静脉内皮细胞 - 干细胞融合细胞具备更强的血管修复与组织再生能力,可用于缺血性疾病(如心肌梗死、下肢缺血)的细胞治疗,促进受损血管再生与组织血流恢复。此外,这类融合细胞还可作为药物筛选模型,用于评估药物对特定细胞相互作用的影响(如抗肿瘤药物对肿瘤 - 内皮细胞相互作用的抑制效果),为药物研发提供高效的体外评价工具,加速新药转化进程。


 

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