WI-38人胚胎肺成纤维细胞源自人胚胎肺组织，呈梭形贴壁生长，增殖能力稳定，是研究肺发育、肺部疾病及药物安全性评估的经典体外模型。

WI-38人胚胎肺成纤维细胞

WI-38人胚胎肺成纤维细胞是体外研究肺部生理发育、疾病机制及生物医药安全评估的经典细胞模型，源自正常人类胚胎肺组织，经标准化分离培养与鉴定后，保留了原代肺成纤维细胞的核心生物学特性，兼具稳定的增殖能力与典型的间质细胞功能，为呼吸系统研究、疫苗研发及药物安全性评价提供了可靠实验材料，在生命科学与医学领域应用历史悠久且科研价值突出。

从细胞来源与生物学特性来看，该细胞分离自妊娠 3 个月左右的正常人类胚胎肺间质组织，肺成纤维细胞作为肺间质的主要功能细胞，承担维持肺组织结构稳定、参与肺组织修复与物质代谢的重要作用，而 WI-38 细胞高度还原了这一生理属性。在形态上，WI-38 人胚胎肺成纤维细胞呈典型的成纤维细胞样形态，胞体呈梭形或长梭形，细胞核呈椭圆形，位于细胞中央，核仁清晰可见，细胞质丰富且呈透明状，体外贴壁培养时，细胞会沿培养瓶壁有序生长，融合后呈现 “漩涡状" 或 “放射状" 的排列特征，这一形态与体内胚胎期肺成纤维细胞的形态高度一致，便于通过光学显微镜观察判断细胞生长状态。在细胞增殖特性方面，WI-38 细胞具有明确的有限增殖能力，符合正常体细胞的 Hayflick 界限，传代次数通常可稳定达到 40-50 代，且在传代过程中始终维持二倍体核型，无恶性转化特征，这一特性使其成为研究细胞衰老、增殖调控机制的理想模型，同时避免了肿瘤细胞系可能带来的实验干扰。在功能标志物表达上，该细胞高表达成纤维细胞特异性标志物，如波形蛋白（Vimentin）、成纤维细胞生长因子受体（FGFR）等，通过免疫荧光染色或 Western blot 检测可明确其细胞身份，且不表达上皮细胞（如细胞角蛋白）、免疫细胞（如 CD45）相关标志物，确保细胞纯度与实验特异性。

在培养条件与操作要点方面，WI-38 人胚胎肺成纤维细胞对培养环境要求温和，常规实验室条件即可满足生长需求。培养基推荐使用含 10%-15% 胎牛血清（FBS）的 MEM（Minimum Essential Medium）或 DMEM 低糖培养基，胎牛血清可提供细胞生长所需的生长因子（如 EGF、PDGF）、激素及营养物质，促进细胞活性维持与增殖；培养环境需严格控制在 37℃、5% CO₂的恒温培养箱中，CO₂浓度可调节培养基 pH 值至 7.2-7.4 的适宜范围，避免 pH 波动影响细胞代谢与增殖。传代操作时，需密切观察细胞融合度，当细胞融合度达到 80%-90% 时进行传代，此时细胞活性最佳，传代后增殖能力稳定。传代前先用磷酸盐缓冲液（PBS）清洗细胞 2-3 次，去除残留培养基与代谢废物，随后加入 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液，37℃孵育 2-3 分钟，待细胞形态变为圆形、细胞间隙明显增大时，立即加入含血清的培养基终止消化，轻轻吹打细胞使其分散成单细胞悬液，按 1:2-1:3 的比例接种至新培养瓶中，避免过度吹打导致细胞损伤。培养过程中需每 2-3 天更换一次培养基，及时清除细胞代谢产生的乳酸、氨等有害物质，防止其积累抑制细胞生长；同时需严格遵守无菌操作规范，所有操作均在超净工作台内进行，培养基、PBS、消化液等试剂使用前需经过滤除菌处理，定期对培养箱、超净工作台进行清洁消毒，每 1-2 周检测细胞是否存在支原体污染（常用 PCR 法或培养法），确保细胞培养稳定性。在细胞冻存与复苏方面，冻存液建议使用含 10% 二甲基亚砜（DMSO）、20% 胎牛血清的基础培养基，将细胞浓度调整为 1×10⁶-1×10⁷个 /mL，按梯度降温法处理：4℃放置 30 分钟→-20℃放置 1 小时→-80℃过夜，次日转入液氮长期保存，可最da程度减少低温对细胞的损伤；复苏时需将冻存管迅速放入 37℃水浴锅，持续轻轻摇晃至细胞悬液wan全融化（约 1-2 分钟），立即加入 5-10 倍体积的新鲜培养基稀释 DMSO，1000rpm 离心 5 分钟后弃上清，用新鲜培养基重悬细胞接种，复苏后 24 小时内观察细胞贴壁率（通常要求≥80%），确保细胞后续实验可用性。

在功能特点与科研应用领域，WI-38 人胚胎肺成纤维细胞凭借其贴近生理状态的生物学特性，被广泛应用于肺部疾病机制研究、疫苗研发、药物安全性评估及细胞生物学基础研究等方面。在肺部疾病机制研究中，该细胞是探究肺纤维化、病毒性肺炎、慢性阻塞性肺疾病（COPD）等疾病的重要模型。例如，在肺纤维化研究中，研究人员可通过向 WI-38 细胞中加入转化生长因子 -β（TGF-β）、血小板衍生生长因子（PDGF）等细胞因子，模拟体内肺成纤维细胞活化过程，观察细胞增殖速率、胶原蛋白（如 ColⅠ、ColⅢ）合成量、α- 平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达水平的变化，进而解析肺纤维化中 “成纤维细胞活化 - 胶原沉积" 的分子机制；在病毒性肺炎研究中，WI-38 细胞对多种呼吸道病毒（如流感病毒、呼吸道合胞病毒）具有敏感性，可用于病毒分离培养、病毒复制机制研究，通过观察病毒感染后细胞病变效应（CPE），检测病毒载量及炎症因子（如 IL-6、TNF-α）分泌水平，为病毒性肺炎的致病机制解析提供实验依据。

在疫苗研发领域，WI-38 细胞是历史悠久且应用广泛的疫苗生产细胞基质，因具有二倍体核型、无致瘤性、能高效支持病毒复制等优势，被用于脊髓灰质炎疫苗、风疹疫苗、水痘疫苗等多种疫苗的生产。例如，在脊髓灰质炎疫苗生产中，WI-38 细胞可高效增殖脊髓灰质炎病毒，且病毒在细胞内可大量复制并释放到培养基中，便于后续病毒纯化与疫苗制备，其安全性与有效性已通过长期临床应用验证。在药物安全性评估方面，该细胞常被用于药物对肺组织毒性的体外评价，如检测药物对细胞存活率、线粒体活性、氧化应激水平的影响，评估药物可能引发的肺损伤风险，为药物临床前安全性评价提供关键数据；同时，也可用于化妆品、食品添加剂等化学品的刺激性测试，减少动物实验成本与伦理争议。此外，在细胞生物学基础研究中，WI-38 细胞因具有明确的衰老周期，是研究细胞衰老机制的经典模型，研究人员可通过分析不同传代次数细胞的端粒长度、衰老相关 β- 半乳糖苷酶活性、衰老相关基因（如 p53、p21）表达变化，解析细胞衰老的分子调控网络，为延缓细胞衰老、干预衰老相关疾病提供理论基础。

综上所述，WI-38 人胚胎肺成纤维细胞凭借其稳定的生物学特性、明确的功能定位及广泛的适用性，成为生命科学与医学研究领域的重要工具，为推动肺部疾病机制解析、疫苗研发、药物安全评估及细胞生物学基础研究发挥了关键作用，即便在多种新型细胞系不断涌现的今天，其在特定研究领域的不可替代性仍使其保持着重要的科研价值。