SMMC-7721人肝癌细胞源自人肝癌组织，贴壁生长，高表达 AFP 等肝癌标志物且致瘤性强，常用于肝癌机制研究、药物筛选及肿瘤微环境互作实验。

SMMC-7721人肝癌细胞

SMMC-7721人肝癌细胞是由中国科学院上海细胞生物学研究所建立的经典贴壁生长肿瘤细胞系，源自临床原发性肝癌患者手术切除的肿瘤组织。作为国内最早建立且应用zui广泛的人肝癌细胞模型之一，其因遗传背景清晰、生物学特性稳定，且能高度模拟原发性肝癌的病理表型与分子特征，成为肝癌领域基础研究、药物研发及临床转化实验的核心工具细胞，被全球科研机构广泛用于肝癌发生机制解析、抗肝癌药物体外评估及肿瘤微环境互作研究。

从生物学特性来看，SMMC-7721 细胞呈现典型的原发性肝癌细胞形态，贴壁生长时以多边形、上皮样细胞为主，胞体大小相对均一（直径约 15-20μm），边界清晰，排列呈 “铺路石样" 但无明显极性（模拟原发性肝癌组织的无序生长状态），约 60% 细胞可见短小伪足（反映中等侵袭能力的形态特征）。胞质丰富呈淡嗜碱性，内含正常数量的细胞器 —— 线粒体形态规则（区别于晚期肝癌细胞的碎片化线粒体，提示细胞代谢紊乱程度较轻）、溶酶体分布均匀（参与基础物质降解），部分细胞胞质内可见少量糖原颗粒（与肝细胞正常代谢残留相关）；细胞核呈圆形或椭圆形，多为单核，核仁明显（1-2 个），染色质呈细颗粒状分布，核质比约为 1:2（低于晚期肝癌细胞，符合原发性肝癌早期至中期的恶性程度特征）。增殖活性较强（倍增时间约 36-48 小时，适配原发性肝癌中等增殖速率的临床特点），传代 80 代后仍保持稳定的恶性表型，无明显衰老或表型漂移迹象。其核心生物学特征是原发性肝癌标志物高表达与明确侵袭潜能：免疫检测显示，细胞高表达原发性肝癌核心标志物 —— 甲胎蛋白（AFP，阳性率＞90%），同时表达磷脂酰肌醇蛋白聚糖 3（GPC3，阳性率＞85%）、细胞角蛋白 18（CK18，阳性率＞95%），与临床多数原发性肝癌患者的标志物表达谱高度契合；分子层面存在 TERT 基因启动子突变（原发性肝癌常见驱动突变）与 Wnt/β-catenin 信号通路异常激活；功能上，Transwell 实验中穿膜细胞数虽低于晚期肝癌细胞系（如 SNU-182），但显著高于正常肝细胞，接种裸鼠皮下 2-3 周可形成实体瘤，接种肝脏可形成局部肝内转移灶，wan美复现原发性肝癌从原发灶生长到早期转移的过程，为原发性肝癌基础研究提供理想模型。

在细胞培养操作层面，SMMC-7721 人肝癌细胞的核心要求是维持原发性肝癌表型与稳定增殖能力，培养方案需适配其中等代谢速率与贴壁特性。适宜环境为 37℃、5% CO₂的恒温培养箱，培养基优先选用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培养基（该配方含适量氨基酸与葡萄糖，可满足细胞基础代谢与增殖需求，胎牛血清需选择内毒素含量＜5EU/mL 的批次，避免内毒素刺激导致细胞炎症反应或信号通路异常激活）；无需额外添加生长因子或特殊营养成分（细胞自主分泌的促增殖因子可满足生长需求，外源性添加易导致细胞过度增殖或表型改变）。日常培养中，需每 2-3 天更换一次新鲜培养基（细胞代谢废物积累速率中等，及时更换可维持培养基 pH 值稳定在 7.2-7.4），更换时沿培养瓶壁缓慢注入培养基，避免冲击细胞层导致伪足脱落（伪足完整性对侵袭实验结果影响显著）；传代时机为细胞融合度达到 80%-90%（细胞接触抑制功能较弱，但过度密集仍会导致细胞凋亡率升高，该融合度可平衡增殖效率与细胞活性），操作步骤需注意：先用 37℃预热的 PBS 清洗细胞 2 次（减少血清残留对消化酶活性的干扰），加入细胞消化液后 37℃孵育 2-3 分钟（细胞贴壁能力中等，消化时间过长易导致细胞损伤），待细胞边缘收缩、间隙增大后立即终止，加入含血清的培养基中和消化酶，用移液器轻柔吹打至单细胞悬液（避免剧烈吹打导致细胞破碎，影响后续实验），按 1:4-1:6 比例接种至新培养瓶，接种密度控制为 2×10⁴ - 4×10⁴ cells/cm²（该密度可使细胞快速进入对数生长期，同时避免低密度导致的生长缓慢）。

在科研应用领域，SMMC-7721 人肝癌细胞凭借原发性肝癌特性，展现出广泛的研究价值。在肝癌机制研究领域，是解析原发性肝癌发生发展分子通路的理想模型：例如，通过沉默或过表达 TERT 基因，观察细胞增殖、端粒长度及 AFP 表达变化，明确 TERT 突变对原发性肝癌细胞永生化的驱动作用；或通过转录组测序对比 SMMC-7721 与正常肝细胞的差异表达基因，筛选原发性肝癌早期诊断标志物（如 miR-21、lncRNA H19），揭示肝癌发生的分子网络。在抗肝癌药物筛选领域，因细胞特性稳定，成为抗原发性肝癌药物体外评估的 “金标准" 模型：可用于广谱抗肝癌药物（如天然化合物、小分子抑制剂）的活性筛选，通过 CCK-8 法检测药物对细胞增殖的抑制率，结合流式细胞术分析药物对细胞凋亡的诱导效果；也可用于靶向药物（如 Wnt/β-catenin 抑制剂、AFP 靶向药物）的特异性评估，通过 Western blot 检测通路蛋白表达或标志物水平变化，验证药物作用靶点的有效性。在肿瘤微环境研究领域，可与肝星状细胞、巨噬细胞共培养，模拟原发性肝癌与微环境细胞的相互作用：例如，探究肝星状细胞分泌的细胞因子（如 TGF-β、IL-6）对 SMMC-7721 细胞侵袭能力的影响，或分析巨噬细胞极化状态对肝癌细胞增殖的调控作用，为靶向肿瘤微环境的联合治疗策略开发提供依据。此外，在肝癌疫苗研发领域，可通过基因工程改造细胞表达特定抗原（如 GPC3），制备肿瘤疫苗候选物，检测其诱导免疫细胞（如 T 细胞）杀伤肝癌细胞的能力，为肝癌免yi治疗研究提供基础。

综上所述，SMMC-7721 人肝癌细胞凭借其稳定的原发性肝癌表型、明确的分子特征及广泛的适用性，成为连接肝癌基础研究与临床转化的关键工具，尤其在原发性肝癌早期机制解析与药物研发中具有不可替代的价值，为推动肝癌研究突破及精准治疗策略发展提供了坚实的细胞模型支撑。