PK136小鼠B淋巴细胞源自小鼠，具免疫活性，可参与体液免疫，适用于小鼠免疫机制研究、B 细胞功能分析及相关疾病模型构建实验。

PK136小鼠B淋巴细胞

PK136小鼠B淋巴细胞是源自小鼠免疫系统的功能性免疫细胞，主要定居于脾脏、淋巴结及骨髓等淋巴组织，因具备 B 淋巴细胞te有的体液免疫功能（如抗体分泌、抗原呈递），且体外可稳定培养并维持免疫活性，成为研究小鼠体液免疫机制、B 细胞发育分化及免疫相关疾病的核心实验模型，为免疫学基础研究与临床免疫疾病转化提供关键工具。

一、核心生物学特性

（一）来源与免疫功能定位

PK136 小鼠 B 淋巴细胞通常从健康小鼠脾脏或淋巴结中分离获取，经密度梯度离心（如 Percoll 梯度离心）纯化后得到高纯度细胞群体。在小鼠免疫系统中，该细胞作为体液免疫的核心参与者，可通过表面 B 细胞受体（BCR）识别特异性抗原，激活后分化为浆细胞或记忆 B 细胞：浆细胞能大量分泌特异性抗体（主要为 IgM、IgG 等免疫球蛋白），参与病原体清除；记忆 B 细胞则可长期留存，在再次接触相同抗原时快速激活，介导二次免疫应答。

（二）形态与表型特征

细胞形态呈圆形或椭圆形，悬浮生长为主，少数贴壁生长的细胞多为活化状态；胞质透明，含少量线粒体与内质网（静息状态下），激活后内质网显著增多（为抗体合成提供结构基础）；细胞核大而圆，占细胞体积的 2/3 左右，核仁清晰，染色质呈细颗粒状均匀分布。表型上，PK136 小鼠 B 淋巴细胞表达 B 细胞特异性表面标志物，如 CD19（全 B 细胞标志物）、CD20（成熟 B 细胞标志物）、MHCⅡ 类分子（抗原呈递相关），同时低表达 CD5（区别于 T 细胞），可通过流式细胞术检测这些标志物实现细胞鉴定与纯度分析，纯度过关的细胞（CD19⁺细胞占比≥90%）方可用于后续实验。

（三）功能特性

PK136 小鼠 B 淋巴细胞的核心功能集中于体液免疫与免疫调节：其一，抗原识别与激活功能，细胞表面 BCR 可特异性结合抗原（如细菌多糖、病毒蛋白），结合后通过信号传导激活细胞内通路（如 PI3K/Akt、NF-κB），启动 B 细胞活化；其二，抗体分泌功能，活化后的细胞经增殖分化为浆细胞，可分泌针对特定抗原的单克隆或多克隆抗体，体外经抗原刺激后，每 10⁶个细胞 24 小时可分泌 10-50μg 抗体；其三，抗原呈递功能，细胞可通过 MHCⅡ 类分子将加工后的抗原肽呈递给 CD4⁺T 细胞，激活 T 细胞免疫应答，参与体液免疫与细胞免疫的协同调控；此外，该细胞还可分泌细胞因子（如 IL-6、TNF-α），调节免疫微环境，参与炎症反应与免疫平衡维持。

二、体外培养关键条件

（一）培养基与添加因子

基础培养基选用 RPMI-1640 培养基，需添加 10%-15% 胎牛血清（需筛选低内毒素、无免疫抑制因子的批次，避免影响细胞免疫活性），同时加入 50μM β- 巯基乙醇（维持细胞内还原环境，防止氧化损伤）、1% glutamine（维持细胞代谢稳定）及 1% 无菌防护试剂（预防细菌污染）。为维持 B 细胞活性与功能，需额外添加细胞因子，如 5-10ng/mL IL-4（促进 B 细胞增殖与 IgG1 类别转换）、2-5ng/mL BAFF（B 细胞活化因子，抑制 B 细胞凋亡），若需诱导细胞活化，可加入 1-5μg/mL 脂多糖（LPS，非特异性激活剂）或特异性抗原。

（二）培养环境与操作

培养环境需严格控制为 37℃、5% CO₂、95% 湿度的恒温恒湿条件，CO₂浓度波动不超过 ±0.5%，避免 pH 剧烈变化影响细胞活性；因细胞悬浮生长，培养瓶需置于水平摇床（转速 30-50rpm），确保细胞均匀分布，获得充足氧气与营养，防止细胞聚团（聚团直径 > 50μm 会导致缺氧死亡）。传代与维护方面，静息状态下的 PK136 小鼠 B 淋巴细胞增殖缓慢，传代周期约 4-5 天，当细胞密度达 1×10⁶-2×10⁶ cells/mL 时，按 1:2-1:3 比例接种至新鲜培养基；活化状态下细胞增殖加快，传代周期缩短至 2-3 天，需每日通过台盼蓝染色检测细胞活力，活力低于 80% 时需更换培养基或调整细胞因子浓度。

（三）冻存与复苏

细胞冻存时，需选用含 10% 二甲基亚砜（DMSO）、20% 胎牛血清的 RPMI-1640 培养基作为冻存液，将细胞浓度调整为 5×10⁶-1×10⁷ cells/mL 后分装，采用梯度降温法（4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮保存），减少冰晶对细胞的损伤；复苏时，将冻存管快速放入 37℃水浴中 1-2 分钟解冻，立即加入 10 倍体积预热的培养基稀释，离心去除 DMSO（1000×g 离心 5 分钟），重悬后接种培养，复苏存活率通常可达 70% 以上，复苏后需通过流式细胞术检测 CD19⁺细胞比例，确保免疫表型稳定。

三、主要实验应用场景

（一）体液免疫机制研究

PK136 小鼠 B 淋巴细胞是该领域的核心模型：科研人员可通过体外抗原刺激（如加入 OVA 卵清蛋白），观察细胞活化标志物（如 CD86、CD69）的表达变化，分析 B 细胞活化信号通路（如 BCR 信号通路）的激活机制；也可通过基因干扰技术（如 siRNA 干扰 CD19 基因），研究关键基因对 B 细胞增殖、分化及抗体分泌的影响，解析体液免疫应答的调控网络。例如，通过检测干扰 CD19 后细胞分泌 IgM 的量，明确 CD19 在 B 细胞抗体分泌中的作用。

（二）B 细胞相关疾病模型构建

该细胞可用于模拟免疫缺陷或自身免疫疾病中的 B 细胞异常状态：将 PK136 小鼠 B 淋巴细胞与免疫缺陷小鼠（如 SCID 小鼠）共移植，构建 B 细胞重建模型，研究 B 细胞缺乏或功能异常导致的免疫缺陷疾病（如 X 连锁无丙种球蛋白血症）；也可通过体外诱导细胞异常活化（如持续加入 LPS），模拟自身免疫疾病（如系统性红斑狼疮）中 B 细胞过度激活、抗体异常分泌的状态，筛选可调控 B 细胞活性的潜在药物。

（三）疫苗与抗体研发

在疫苗效果评估中，可将 PK136 小鼠 B 淋巴细胞与疫苗抗原共培养，检测细胞活化程度及抗体分泌量，评估疫苗对体液免疫的诱导效果；在单克隆抗体制备中，该细胞可作为融合亲本，与骨髓瘤细胞融合构建杂交瘤细胞，筛选能分泌特异性抗体的细胞株，为小鼠来源的单克隆抗体制备提供优质 B 细胞材料。此外，还可通过体外培养该细胞，研究抗体类别转换（如 IgM 向 IgG 的转换）机制，为抗体改造与优化提供理论基础。

四、实验应用注意事项

细胞培养过程中需严格维持无菌环境，PK136 小鼠 B 淋巴细胞对微生物污染（如细菌、真菌）极为敏感，污染后易快速凋亡，每培养 2-3 天需通过显微镜观察培养基状态，若出现浑浊或异常沉淀，需立即排查污染；同时，需避免反复冻融细胞，每次冻融都会导致 10%-20% 的细胞活性下降，建议分装为小体积冻存管，一次复苏后尽快使用。

功能实验中需注意细胞活化状态的调控，静息状态的 PK136 小鼠 B 淋巴细胞抗体分泌量极低，需根据实验需求选择合适的激活剂（如 LPS 或特异性抗原），激活时间通常为 24-48 小时，激活过度会导致细胞大量凋亡；此外，流式细胞术检测表型时，需设置同型对照抗体，排除非特异性结合干扰，确保标志物检测结果的准确性。

结果解读需结合体内免疫微环境，体外培养的 PK136 小鼠 B 淋巴细胞虽能模拟部分体液免疫过程，但缺乏体内 T 细胞、巨噬细胞等免疫细胞的协同作用，实验结论需结合动物模型（如小鼠免疫实验）综合分析；同时，不同品系小鼠来源的 B 淋巴细胞功能存在差异，实验中需明确细胞来源品系，避免因品系差异导致结果偏差。