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人胚胎心肌组织来源细胞
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人胚胎心肌组织来源细胞取自胚胎心肌组织,具心肌细胞分化潜能,可模拟心肌收缩、参与心肌发育,可体外培养,是心肌发育、心脏病机制及药物筛选的重要材料。

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更新时间:2025-10-13

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人胚胎心肌组织来源细胞

人胚胎心肌组织来源细胞是从胚胎发育阶段(通常为孕 4-8 周,心肌发育关键期)的心肌组织中分离获得的未wan短梭形,胞质中可见早期肌丝结构,体外培养时可逐渐形成细胞簇,部分细胞簇能出现微弱的节律性收缩,模拟心肌细胞的基本功能特征;细胞表面表达心肌干 / 祖细胞特异性标志物,如肌细胞生成素(MyoG,心肌分化关键转录因子)、心肌肌钙蛋白 I(cTnI,早期心肌细胞标志物)及 NK2 转录因子相关家族成员 5(NKX2.5,心脏发育核心调控因子),这些标志物不仅是鉴别细胞身份的关键依据,也反映了其向成熟心肌细胞分化的潜力。因能重现心肌胚胎发育的分化路径,且可在体外诱导为具有收缩功能的心肌细胞,这类细胞在心脏发育生物学、心血管疾病研究及再生医学领域具有不可替代的价值。

从细胞来源与分化特性来看,胚胎心肌来源细胞的分离需依托严谨的胚胎心肌组织处理流程:首先获取伦理审批通过的胚胎心脏组织,在无菌条件下去除心bao膜、血管及结缔组织,保留纯净的心肌组织;将心肌组zhi剪碎为 1-3mm³ 的小块,用温和的酶解溶液(如胶原酶 Ⅱ 型与yi酶混合液)在 37℃条件下分次消化,使细胞从心肌纤维束中分散;通过离心纯化去除酶溶液与组织碎片,用含胎牛血清的培养基重悬细胞,获得原代细胞悬液;最后利用免疫磁珠分选技术(针对 NKX2.5 或 cTnI 标志物)进一步纯化,获得纯度达 90% 以上的目标细胞群体。其核心特性在于 “心肌定向分化能力"—— 在特定诱导条件下,这类细胞可逐步分化为成熟的心肌细胞类型,包括工作心肌细胞(心房肌细胞、心室肌细胞)与传导心肌细胞(窦房结细胞、房室结细胞):分化过程中,细胞会逐渐伸长呈梭形或杆状,胞质内肌丝结构增多并有序排列,形成明显的横纹;同时开始表达成熟心肌标志物(如 α- 肌动蛋白、β- 肌球蛋白重链),并出现规律的节律性收缩,收缩频率可达到 30-60 次 / 分钟,且对心肌收缩调节剂(如肾上腺素、阿tuo品)产生响应,具备成熟心肌细胞的功能特征。

在核心生理功能方面,胚胎心肌来源细胞的作用集中体现在 “心肌发育模拟"“功能心肌细胞诱导" 及 “心脏疾病机制研究载体" 三大维度。心肌发育模拟功能是其最独特的价值 —— 这类细胞保留了胚胎心肌发育的分子调控网络,在体外培养时,可通过调控关键信号通路(如 Wnt 通路、BMP 通路)重现心肌发育的关键阶段:例如,激活 Wnt 通路可促进细胞向心肌祖细胞方向增殖,抑制则推动其向成熟心肌细胞分化;激活 BMP 通路可诱导细胞向心室肌细胞分化,而抑制则倾向于分化为心房肌细胞。通过观察这一过程中基因表达的动态变化(如 NKX2.5、MyoG、GATA4 的表达趋势),可深入解析心肌胚胎发育的分子机制,为理解先天性心脏病(如室间隔缺损、法洛四联症)的发病原因提供依据。

功能心肌细胞诱导功能是其在再生医学中的核心应用基础 —— 通过优化诱导条件(如添加心肌营养因子,如心肌营养素 - 1、成纤维细胞生长因子 2;调节培养基中血清浓度),可将这类细胞高效诱导为成熟的工作心肌细胞:诱导后的心室肌细胞可形成心肌细胞簇,产生与体内心室肌相似的收缩力,且收缩功能可通过电刺激或药物调控;同时,细胞还能形成功能性缝隙连接(表达连接蛋白 43),实现细胞间的电信号传导,模拟心肌组织的同步收缩功能。这种诱导分化获得的功能心肌细胞,不仅可用于心肌损伤修复的细胞移植研究,还能为体外评估药物对心肌功能的影响提供理想模型。

心脏疾病机制研究载体功能体现在其对心脏疾病的模拟能力 —— 例如,通过基因编辑技术(如 CRISPR-Cas9)在这类细胞中敲除先天性心脏病相关致病基因(如 TBX5、GATA4),可观察基因缺失对心肌分化、收缩功能的影响,解析疾病的分子机制;同时,也可通过模拟病理环境(如缺氧、高糖、氧化应激),观察细胞出现的分化异常、凋亡增加或收缩功能障碍,为研究缺血性心脏病、糖尿病心肌病等疾病中心肌细胞的损伤过程提供体外模型。

体外培养条件方面,胚胎心肌来源细胞的培养需模拟胚胎心脏微环境,重点维持其祖细胞特性与分化潜能。基础培养基选用含 15%-20% 胎牛血清的 DMEM/F12 混合培养基,添加关键生长因子以维持细胞活性:如干细胞因子(SCF,10ng/mL)、白血病抑制因子(LIF,5ng/mL),可抑制细胞过早分化,维持其心肌祖细胞状态;同时添加抗生素预防微生物污染。培养环境控制在 37℃恒温、5% CO₂浓度的培养箱中,培养基 pH 稳定在 7.2-7.4 之间,湿度保持 50%-60%;每 2-3 天更换一次培养基,避免营养耗尽与代谢废物堆积;当细胞融合度达到 60%-70% 时进行传代,传代时需用低浓度yi酶(0.05% yi酶 - EDTA)温和消化,避免过度损伤细胞,通常可稳定传代 5-7 代,超过 7 代后细胞易出现分化潜能下降、收缩功能减弱等问题。培养过程中,需定期通过免疫荧光染色检测 NKX2.5、cTnI 等标志物,或通过实时定量 PCR 分析心肌分化相关基因的表达水平,验证细胞的功能状态,确保实验结果可靠。

在科研与临床应用价值上,胚胎心肌来源细胞的应用场景广泛且针对性强。在基础科研领域,可用于探索心脏发育的分子调控网络 —— 如研究转录因子(NKX2.5、GATA4)在心肌细胞谱系建立中的协同作用,或分析信号通路(如 Hedgehog、Notch)对心脏腔室形成的影响,为心脏发育生物学提供关键数据;同时,这类细胞也是研究心肌细胞成熟机制的重要模型,通过分析诱导分化过程中细胞电生理特性(如动作电位、钙信号)的变化,可揭示心肌细胞成熟的关键分子事件。在心血管疾病研究领域,其应用集中在两个方向:一是机制研究,通过构建疾病相关基因修饰细胞模型,解析基因变异对心肌功能的影响;二是药物研发,利用诱导分化的成熟心肌细胞,筛选可改善心肌收缩功能、保护心肌细胞免受损伤的候选药物(如 β 受体阻滞剂、心肌保护剂),同时通过检测药物对心肌细胞电生理特性的影响,评估药物潜在的心脏毒性(如致心律失常风险),为心血管药物的研发与安全性评价提供科学依据。在再生医学领域,胚胎心肌来源细胞诱导分化的功能心肌细胞,是心肌损伤修复的潜在种子细胞 —— 动物实验已证实,将诱导后的心肌细胞移植到心肌梗死模型小鼠体内,可整合到受损心肌组织中,改善小鼠的心脏收缩功能,减少心肌瘢痕面积;未来通过优化诱导效率与移植策略,有望为心肌梗死、心力衰竭等疾病患者提供新的治疗方案。此外,这类细胞还可用于构建心肌类器官 —— 通过三维培养技术,使细胞形成类似胚胎心脏的微型器官结构,具备更接近体内的心肌组织形态与功能,为心脏疾病的体外模型构建、药物筛选及个性化医疗研究奠定基础。


 

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