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更新时间:2025-10-13
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人食管癌细胞
人食管癌细胞是源于食管癌组织的恶性肿瘤细胞群体,食管癌作为全球高发的消化道恶性肿瘤,主要分为鳞癌与腺癌两大亚型,其中鳞癌在我国占比超 90%。这类细胞携带食管癌的核心恶性特征,是临床中肿瘤进展、转移及治疗耐药的 “核心驱动者",同时因可在体外稳定培养并保留体内肿瘤的生物学特性,成为解析食管癌发病机制、探索治疗靶点及筛选抗癌药物的核心实验模型,在消化道肿瘤基础科研与临床转化领域具有不可替代的价值。
从细胞来源与临床背景来看,这类细胞的获取主要依托于临床诊疗场景 —— 包括食管癌手术切除的原发肿瘤组织、内镜活检获取的病灶样本,或胸腔积液、血液中分离的转移灶肿瘤细胞。临床中,这类细胞的发生与长期吸烟饮酒、高盐饮食、霉变食物摄入(含亚硝胺、黄qu霉素)及遗传突变(如 TP53、NOTCH1 基因失活)密切相关:长期刺激会破坏食管黏膜屏障,导致黏膜上皮细胞反复损伤修复,逐步积累基因突变;而基因层面的异常会使细胞失去正常增殖调控,最终转化为恶性肿瘤细胞。目前科研领域常用的食管癌细胞系(如 Eca-109、TE-1、KYSE-450)多源于不同病理类型的食管癌患者,经长期体外培养纯化建立,因增殖稳定、恶性表型典型,可满足不同研究需求,有效规避原代细胞来源稀缺、个体差异大的局限。
在核心生物学特性方面,这类细胞的恶性特征集中体现在 “无序增殖"“强侵袭转移能力"“表型异质性" 与 “高耐药性" 四大维度。无序增殖是其基础特征 —— 细胞倍增时间约 24-48 小时,远快于正常食管上皮细胞,体外培养时可快速形成致密细胞克隆,体内则通过突破细胞周期检查点(如 TP53 基因失活导致 G1/S 期调控失效),无限制分裂并侵犯食管壁各层,从黏膜层逐步进展至肌层、外膜层。强侵袭转移能力是导致食管癌预后差的关键 —— 细胞可分泌基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)降解食管壁基底膜与间质组织,通过 “上皮 - 间质转化"(EMT)获得迁移能力,进而通过淋巴道转移至食管旁淋巴结,或通过血道转移至肝、肺、骨等远处器官,统计显示约 30% 的患者确诊时已出现区域或远处转移。表型异质性是其重要特点 —— 同一食管癌组织中,不同细胞亚群在增殖速度、侵袭能力、耐药性上存在显著差异,部分细胞还可表达肿瘤干细胞标志物(如 CD44、CD133),这类细胞不仅耐药性更强,还能促进肿瘤复发,增加临床治疗难度。高耐药性则是治疗的主要障碍 —— 初始治疗时,细胞对铂类、氟尿mi啶类等抗癌药物可能敏感,但长期治疗后易通过多种机制产生耐药:如 ABC 转运蛋白(ABCB1、ABCG2)高表达将药物泵出细胞外、DNA 修复酶(ERCC1)活性增强修复药物诱导的损伤、凋亡通路(如 BCL-2 过表达)受阻抑制细胞死亡,最终导致治疗效果下降。
体外培养条件方面,这类细胞的培养需模拟食管黏膜的微环境,兼顾细胞活性与恶性特性维持。基础培养基常选用 RPMI-1640 或 DMEM 培养基,添加 10%-15% 胎牛血清以提供氨基酸、生长因子等营养物质,同时补充抑菌成分预防细菌污染。部分分化程度低的食管癌细胞系对营养需求更高,可额外添加胰岛素(5μg/mL),提升细胞增殖效率。培养环境需控制在 37℃恒温、5% CO₂浓度的培养箱中,培养基 pH 稳定在 7.2-7.4 之间,湿度保持在 50%-60%,防止培养基蒸发导致渗透压改变。细胞多呈贴壁生长,接种后 24-36 小时完成贴壁,显微镜下观察呈多边形或梭形,胞核大且核仁明显;当细胞融合度达 80%-90% 时需及时传代,用细胞消化液处理 2-3 分钟,待细胞间隙增大后,用含血清培养基终止消化,按 1:3-1:5 比例接种至新鲜培养皿。需注意的是,长期培养需定期检测细胞的恶性特性(如 Transwell 侵袭实验、克隆形成实验)与遗传稳定性(染色体核型分析),避免细胞传代后表型退化;同时通过 STR 分型验证细胞身份,防止与其他肿瘤细胞系交叉污染,确保实验结果可靠。
在科研与临床应用价值上,这类细胞是食管癌研究的 “多功能工具",覆盖机制解析、耐药研究及药物研发等维度。在发病机制研究中,这类细胞可用于探索基因突变的功能 —— 通过 CRISPR-Cas9 技术修复 TP53 或 NOTCH1 基因,观察细胞增殖、侵袭能力的变化,明确抑癌基因失活在食管癌发生中的作用;或研究亚硝胺类致癌物对细胞的损伤机制,为食管癌预防提供理论依据。在耐药研究中,可通过体外诱导构建耐药细胞模型,对比敏感与耐药细胞的基因表达差异,筛选耐药靶点(如 ABCB1、ERCC1),为开发逆转耐药的药物提供方向。在药物研发领域,这类细胞是抗癌药物筛选的核心平台 —— 通过 MTT 法、CCK-8 法检测候选药物(如靶向 EGFR 的单抗、新型小分子抑制剂)对细胞增殖的抑制效果;利用裸鼠移植瘤模型验证药物的体内疗效,加速从基础研究到临床应用的转化。此外,在临床诊断研究中,细胞分泌的肿瘤标志物(如 CEA、SCC-Ag)可作为体外诊断试剂的检测靶点,为食管癌的早期筛查、疗效监测及预后评估提供技术支持。
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