Vero非洲绿猴肾细胞源自非洲绿猴肾脏组织，呈上皮样贴壁生长，易培养且支持病毒增殖，是病毒学研究、疫苗生产及药物安全性评估的常用模型。

Vero非洲绿猴肾细胞

Vero非洲绿猴肾细胞是生命科学与生物医药领域应用zui广泛的细胞系之一，源自非洲绿猴（Cercopithecus aethiops）的肾脏皮质细胞，经体外分离培养与长期传代纯化后，保留了上皮细胞的典型结构与生物学特性，兼具易培养、增殖稳定及对多种病毒高度敏感的优势，为病毒学研究、疫苗生产、药物安全性评估及细胞生物学基础研究提供了可靠实验材料，在医学与生物医药产业中占据不可替代的地位。

从细胞来源与生物学特性来看，该细胞系于 1962 年由日本科学家首ci建立，原始细胞分离自成年非洲绿猴的肾脏皮质部，属于贴壁生长的上皮样细胞。在形态上，Vero 细胞呈典型的上皮细胞形态，胞体为多边形或不规则圆形，大小均匀（直径约 15-25μm），细胞核大而圆，位于细胞中央，核仁清晰可见（1-2 个），染色质呈细颗粒状均匀分布，细胞质丰富且含较多细胞器（如线粒体、内质网），体外贴壁培养时，细胞紧密排列成单层，呈 “铺路石" 样生长，无接触抑制现象（可形成多层生长），这一形态特征便于通过光学显微镜观察判断细胞生长状态与是否存在污染。在分子特征与遗传特性方面，Vero 细胞为近二倍体细胞，核型稳定（染色体数约 60 条，含非洲绿猴te有的染色体标记），不表达干扰素（IFN）基因（这一特性使其对多种依赖干扰素敏感性的病毒高度易感），同时低表达或不表达内源性逆转录病毒，生物安全性较高，符合生物医药生产的质控标准。此外，Vero 细胞具有强大的增殖能力，在适宜培养条件下，倍增时间约为 24-36 小时，可长期传代（传代次数可达数百代）且生物学特性不易发生改变，为大规模培养与工业化生产提供了可能。

在培养条件与操作要点方面，Vero 细胞对培养环境适应性较强，常规实验室条件即可满足生长需求，但其大规模培养需严格把控环境参数以保证细胞质量。培养基推荐使用含 10%-15% 胎牛血清（FBS，需选择无支原体、低内毒素的优质血清）的 DMEM 高糖培养基（或 MEM 培养基），高糖环境可满足细胞高代谢需求，胎牛血清能提供生长因子（如 EGF、PDGF）、氨基酸及营养物质，促进细胞活性维持与增殖；培养环境需控制在 37℃、5% CO₂的恒温培养箱中，CO₂浓度可稳定培养基 pH 值在 7.2-7.4 的适宜范围，同时需保证培养箱内相对湿度≥95%（避免培养基蒸发导致渗透压改变）。传代操作时，需密切观察细胞融合度，当细胞融合度达到 80%-90% 时进行传代（过度融合易导致细胞脱落或活力下降），传代前先用磷酸盐缓冲液（PBS）清洗细胞 2-3 次，去除残留培养基与代谢废物，随后加入 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液，37℃孵育 3-5 分钟（因细胞贴壁较牢固，消化时间略长于普通上皮细胞），待细胞间隙明显增大、多边形细胞收缩变圆时，立即加入含血清的培养基终止消化，轻轻吹打细胞使其分散成单细胞悬液（避免过度吹打导致细胞破碎），按 1:3-1:5 的比例接种至新培养瓶中。培养过程中需每 2-3 天更换一次培养基，及时清除细胞代谢产生的乳酸、氨等有害物质；同时需严格遵守无菌操作规范，所有操作均在超净工作台内进行，培养基、PBS、消化液等试剂使用前需经 0.22μm 滤膜过滤除菌，定期（每 1-2 周）通过 PCR 法或培养法检测细胞是否存在支原体污染，确保细胞培养稳定性与生物安全性。在细胞冻存与复苏方面，冻存液建议使用含 10% 二甲基亚砜（DMSO）、20% 胎牛血清的 DMEM 高糖培养基，将细胞浓度调整为 1×10⁶-2×10⁶个 /mL，按梯度降温法处理：4℃放置 30 分钟→-20℃放置 1 小时→-80℃过夜，次日转入液氮长期保存（可保存数年）；复苏时需将冻存管迅速放入 37℃水浴锅，持续轻轻摇晃至细胞悬液wan全融化（约 1-2 分钟，避免 DMSO 长时间接触细胞导致损伤），立即加入 5-10 倍体积的新鲜培养基稀释 DMSO，1000rpm 离心 5 分钟后弃上清，用新鲜培养基重悬细胞接种，复苏后 24 小时内观察细胞贴壁率（通常要求≥80%），确保细胞后续实验或生产使用。

在功能特点与科研应用领域，Vero 细胞凭借其对多种病毒的敏感性、高增殖能力及生物安全性，被广泛应用于病毒学研究、疫苗生产、药物安全性评估及细胞生物学研究等方面。在病毒学研究中，Vero 细胞是分离、鉴定与增殖病毒的理想宿主细胞 —— 可支持脊髓灰质炎病毒、麻疹病毒、风疹病毒、乙型脑炎病毒、新guan病毒等多种 RNA 病毒及部分 DNA 病毒（如单纯疱疹病毒）的高效增殖，通过观察病毒感染后细胞出现的病变效应（CPE，如细胞皱缩、融合、脱落），可实现病毒的分离培养与滴度测定；同时，利用 Vero 细胞可研究病毒的复制机制（如通过 Western blot 检测病毒蛋白表达、实时荧光定量 PCR 检测病毒 RNA 复制水平），解析病毒与宿主细胞的相互作用（如病毒对细胞信号通路的影响、细胞抗病毒因子的表达变化），为病毒致病机制研究与抗病du药物研发提供实验模型。

在疫苗生产领域，Vero 细胞是全球应用zui广泛的疫苗生产细胞基质之一，被用于脊髓灰质炎疫苗、狂犬病疫苗、乙型脑炎疫苗、新guan疫苗等多种人用疫苗的工业化生产。其优势在于：增殖稳定可实现大规模悬浮培养（如生物反应器培养，细胞密度可达 1×10⁷个 /mL 以上），生物安全性高（无致瘤性、低内源性病毒风险），且能高效表达病毒抗原，生产的疫苗免疫原性强、安全性好，已通过长期临床应用验证（如脊髓灰质炎疫苗使用 Vero 细胞生产已数十年，安全性与有效性得到全qiu公ren）。在药物安全性评估方面，Vero 细胞可用于药物的细胞毒性检测（如通过 MTT 法、CCK-8 法检测药物对细胞存活率的影响）、皮肤黏膜刺激性检测（如模拟药物对上皮细胞的刺激作用）及抗病du药物活性筛选（如检测药物对病毒诱导 CPE 的抑制效果），为药物临床前安全性评价与活性验证提供关键数据；此外，还可用于化妆品、食品添加剂等化学品的安全性测试，减少动物实验成本与伦理争议。

在细胞生物学研究中，Vero 细胞可作为研究上皮细胞生理功能的模型（如细胞黏附、物质转运、信号传导机制），也可用于基因工程研究（如通过脂质体转染、病毒载体介导等方法实现外源基因的稳定表达，构建转基因细胞系），为细胞生物学基础研究提供工具。

综上所述，Vero 非洲绿猴肾细胞凭借其稳定的生物学特性、广泛的病毒敏感性、高生物安全性及工业化培养潜力，成为生物医药领域的核心工具细胞，为推动病毒学研究、疫苗产业发展、药物研发及细胞生物学基础研究发挥关键作用，未来在应对新发突发传染病（如新型病毒疫情）、优化疫苗生产工艺及研发新型抗病du药物中仍将保持重要地位。