反转录试剂盒采用经优化的稳定的反转录预混体系5×RTMasterMix进行RNA的反转录反应，该预混体系包含点突变致RNaseH活性缺失的反转录酶M-MLVⅢ、dNTP、反应Buffer和RNaseInhibitor。该试剂盒采用的反转录酶为经进一步改良的M-MLVⅢ，可以极大限度地抑制RNA结构与反转录酶的非特异性结合，不仅保证了的cDNA合成效率和cDNA合成速度，同时也使得合成的cDNA本底低、纯度高、完整性好。使用时只需加入模板、引物和RNaseFreeH2O即可，大大简化了操作过程,提高了效率,减少了操作过程中的人为误差,具有快速简便、重复性高、特异性好、灵敏度高和稳定性好的特点。本试剂盒提供了进行RT-PCR所需要的全部试剂。使用本试剂盒扩增得到的目的产物3'端具有A尾，可以直接克隆于T载体中。

储存：

请放置于-20°C，可保存两年，请避免反复冻融

操作方法

1.按以下组分配制反转录反应液

TotalRNAorPoly（A）RNA0.2-2μg

5×RTMasterMix4μl

*Oligo（dT）20Primer1μl

RNaseFreeH2OUpto20μl

*注：反转录引物可根据需要改用随机引物或

特异性引物。

2.在PCR仪上按以下条件进行反转录反应:

30°C5min

42°C30~60min

85°C5min

4°C

3.配置反应体系如下进行PCR扩增：

2×TaqPCRMix25μl

反转录产物1-5μl

上游引物（10μM）2μl

下游引物（10μM）2μl

灭菌双蒸水Upto50μl

4.PCR扩增循环参数

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