细胞培养基的几点基本要求

现代生物技术均通过细胞作为载体来进行，无论是基因治疗、干细胞、克隆技术都在细胞内进行的。细胞的生长需要一定的营养环境，用于维持细胞生长的营养基质称为培养基，即指所有用于各种目的的体外培养、保存细胞用的物质，就其本意上讲为人工模拟体内生长的营养环境，使细胞在此环境中有生长和繁殖的能力。它是提供细胞营养和促进细胞生长增殖的物质基础。细胞培养基其组成成分主要有：水、氨基酸、维生素、碳水化合物、无机离子及其他一些入核酸降解物、激素等。细胞培养基的基本要求---体外培养的细胞直接生活在...

查看更多

ELISA质量控制--质量控制血清

ELISA是一种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法，由于其试剂稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素，以及既适宜于大规模筛查试验又可以用于少量标本的检测，既可以做定性试验也可以做定量分析等优点，已广泛应用于微生物学、寄生虫学、肿瘤学和细胞因子等领域。ELISA的影响因素较多，加强质量管理才能充分发挥其方法学的优点。质控血清是已有靶值的血清，在每次的常规检验中加入一份或数份，通过所得结果来了解本次检验的情况。质控血清检验的结果如能控制其误差在一定范围内，就说明该检...

查看更多

培养基的简介

培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素、色素、激素和血清。培养基由于配制的原料不同，使用要求不同，而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基），较长时间的贮存，必须放在2~6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管，现在均改制成粉末。

查看更多

近年来新建立的与补体有关的血清学试验

（一）单扩散溶血试验（singleradialhemolysis）又称固相溶血试验。根据抗原（如绵羊红细胞）与相应抗体相遇形成的免疫复合物，可通过传统途径激活补体，使绵羊红细胞发生溶血，其溶血程度与特异抗体滴度成正比的原理设计而成。现以鼻疽为例说明其操作原则。取鼻疽抗原致敏的绵羊红细胞加入融化的琼脂糖凝胶中，混合均匀，浇注反应盘，制成致敏的反应盘，打孔，随后将被检血清和补体的等量混合物加入到上述致敏反应盘孔中，于室温下感作3～4小时，阳性者，在孔的周围发生明显的溶血环，其直径...

查看更多

配制培养基的原则

1、选择适宜的营养物质:总体而言，所有微生物生长繁殖均需要培养基含有碳源、氮源、无机盐、生长因子、水及能源，但由于微生物营养类型复杂，不同微生物对营养物质的需求是不一样的，因此首先要根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。自养型微生物能从简单的元机物合成自身需要的糖类、脂类、蛋白质、核酸、维生素等复杂的有机物，因此培养自养型微生物的培养基*可以（或应该）由简单的无机物组成。例如，培养化能自养型的氧化硫硫杆菌（Thiobacillusthiooxdans）的培养基组成见表...

查看更多

培养基的灭菌原理及方法

所谓灭菌就是杀死一切微生物，包括微生物的营养体和芽孢，这一概念不同于消毒。后者是指消灭一切致病微生物（病原体）。在发酵生产中为什么要灭菌呢？主要有以下几点原因：如不灭菌，会使生物反应的基质或产物，因杂菌的消耗而损失，造成生产能力的下降；杂菌也会产生代谢产物，这就使产物的提取更加困难，造成得率降低，产品质量下降；有些杂菌会分解产物，使生产失败；杂菌大量繁殖后，会改变反应液的pH值，使反应异常；如果发生噬菌体污染，生产菌细胞将被裂解，使生产失败。一、培养基灭菌的原理和方法:灭菌的...

查看更多

抗血清鉴定

抗血清的质量直接影响分析方法的特异性和灵敏度。用于鉴定抗血清质量的参数主要有几项：1．亲和性（affinity）是指抗体分子上一个抗原结合部位与相应的抗原决定簇之间的结合强度，常用亲和常数Ka表示。Ka是正／逆向反应速度常数的比值，单位为稀释度单位（L／mol或LM-1），表示需将lmol抗体稀释至多少升，才能使抗原—抗体结合下降50％；而Ka的倒数为解离常数（Kd），其单位为浓度单位（mol／L）。为提高放射免疫分析的灵敏度、精密度和准确度，需选用Ka值高（109一1012...

查看更多

鸡二胺氧化酶（DAO）Elisa试剂盒说明书

本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T,0.8U/ml-26U/ml.使用目的：本试剂盒用于测定鸡血清、血浆及相关液体样本中二胺氧化酶（DAO）含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡二胺氧化酶（DAO）水平。用纯化的鸡二胺氧化酶（DAO）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入二胺氧化酶（DAO），再与HRP标记的二胺氧化酶（DAO）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸...

查看更多