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天然培养基是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基,如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期,体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大,因此逐渐为合成培养基所替代。目前广泛使用的天然培养基是血清,另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是*。血清种类,目前用于组织培养的血清主要是牛血清,培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。选择用牛血清培养细胞的原因:来源充足、制备技术成熟、经过长时间的应用考验人...
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现代生物技术均通过细胞作为载体来进行,无论是基因治疗、干细胞、克隆技术都在细胞内进行的。细胞的生长需要一定的营养环境,用于维持细胞生长的营养基质称为培养基,即指所有用于各种目的的体外培养、保存细胞用的物质,就其本意上讲为人工模拟体内生长的营养环境,使细胞在此环境中有生长和繁殖的能力。它是提供细胞营养和促进细胞生长增殖的物质基础。细胞培养基其组成成分主要有:水、氨基酸、维生素、碳水化合物、无机离子及其他一些入核酸降解物、激素等。细胞培养基的基本要求---体外培养的细胞直接生活在...
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ELISA是一种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法,由于其试剂稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素,以及既适宜于大规模筛查试验又可以用于少量标本的检测,既可以做定性试验也可以做定量分析等优点,已广泛应用于微生物学、寄生虫学、肿瘤学和细胞因子等领域。ELISA的影响因素较多,加强质量管理才能充分发挥其方法学的优点。质控血清是已有靶值的血清,在每次的常规检验中加入一份或数份,通过所得结果来了解本次检验的情况。质控血清检验的结果如能控制其误差在一定范围内,就说明该检...
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(一)单扩散溶血试验(singleradialhemolysis)又称固相溶血试验。根据抗原(如绵羊红细胞)与相应抗体相遇形成的免疫复合物,可通过传统途径激活补体,使绵羊红细胞发生溶血,其溶血程度与特异抗体滴度成正比的原理设计而成。现以鼻疽为例说明其操作原则。取鼻疽抗原致敏的绵羊红细胞加入融化的琼脂糖凝胶中,混合均匀,浇注反应盘,制成致敏的反应盘,打孔,随后将被检血清和补体的等量混合物加入到上述致敏反应盘孔中,于室温下感作3~4小时,阳性者,在孔的周围发生明显的溶血环,其直径...
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所谓灭菌就是杀死一切微生物,包括微生物的营养体和芽孢,这一概念不同于消毒。后者是指消灭一切致病微生物(病原体)。在发酵生产中为什么要灭菌呢?主要有以下几点原因:如不灭菌,会使生物反应的基质或产物,因杂菌的消耗而损失,造成生产能力的下降;杂菌也会产生代谢产物,这就使产物的提取更加困难,造成得率降低,产品质量下降;有些杂菌会分解产物,使生产失败;杂菌大量繁殖后,会改变反应液的pH值,使反应异常;如果发生噬菌体污染,生产菌细胞将被裂解,使生产失败。一、培养基灭菌的原理和方法:灭菌的...
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