分子克隆和质粒载体构建技术服务|实验技术服务

关键词:分子克隆和质粒载体构建技术服务|实验技术服务
简介：世界*品牌分子克隆和质粒载体构建技术服务|实验技术服务原装，质量保证,*。
分子克隆和质粒载体构建技术服务|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。
我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧，承诺客户不成功不收费。我们所有的实验数据真实可信，我们提供原始的表达菌株和克隆质粒，客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。
产品品牌：   http://www.。。ｃｏｍ/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
测序实验流程：
分子克隆的相关载体：DNA片段的克隆需要合适的载体，载体或是质粒，或是噬菌体，或是病毒，通常大多经过人工改造。作为载体必须具备两条件：一是该载体在细胞内必须能自主复制，即必须具备复制原点；二是该载体必须具备适合的酶切位点，且这些酶切位点不在复制原点区域内。以上两条，保证了载体的可繁殖性和可利用性。为了便于获得阳隆克隆，载体上常有筛选标记，如对抗菌素的抗性，某些基因产物的显色反应等。
服务要求： 
1、请以等形式告知我们服务的主要目的及具体要求。
2、提供外源DNA的来源及背景资料。DNA来源包括：PCR扩增产物；RT－PCR扩增产物；从其它质粒上酶切得到的DNA片段等。
3、提供DNA片段的电泳照片，并请标明Marker有浓度。
4、提供载体来源与背景资料。
5、注明克隆使用的酶切位点以及是否需要平端连接等。
相关材料说明： 
1、对于实验材料中涉及病原体等危险材料不接受。
2、实验中涉及的碱基序列请以的形式发到我中心。
3、实验中的使用载体要尽量提供背景资料：（质粒大小，抗性，拷贝数，多克隆位点等）如果是商品化载体，请您提供生产厂家及标准名称；如果所提供载体是您自己构建的请注明大体结构情况。
4、我中心可以提供常用的如（氨苄青霉素，氯霉素，卡那霉素）以外的抗生素需您提供。
5、您自己提供的引物如果为干品，请您标注具体的OD数，如果是液体态，请您标明浓度。
6、可以用甘油菌和穿刺菌形式邮寄菌体。（同时提供相应的质粒）；如果提供质粒，则质粒的量在4ug以上；如果提供的是PCR产物，则PCR产物量在5u以上（附上电泳图）
7、用于提取RNA/DNA的材料要新鲜。采样时应首先在液氮中速冻，保存在－80度的冰箱中，使用干冰运输。
载体DNA的选择 
分子克隆载体
①质粒:质粒是细菌染色体外遗传因子，DNA呈环状，大小为1-200千碱基对(kb)。在细胞中以游离超螺旋状存在，很容易制备。质粒DNA可通过转化引入寄主菌。在细胞中有两种状态，一是"紧密型";二是"松弛型"。此外还应具有分子量小，易转化，有一至多个选择标记的特点。质粒型载体一般只能携带10kb以下的DNA片段，适用于构建原核生物基因文库，cDNA库和次级克隆。
②噬菌体DNA:常用的λ噬菌体的DNA是双链，长约49kb，约含50个基因，其中50%的基因对噬菌体的生长和裂解寄主菌是必需的，分布在噬菌体DNA两端。中间是非必需区，进行改造后组建一系列具有不同特点的载体分子。λ载体系统zui适用于构建真核生物基因文库和cDNA库。
M13噬菌体是一种*的载体系统，它只能侵袭具有F基因的大肠杆菌，但不裂解寄主菌。M13DNA(RF)在寄主菌内是双链环状分子，象质粒一样自主复制，制备方法同质粒。寄主菌可分泌含单链DNA的M13噬菌体，又能方便地制备单链DNA，用于DNA顺序分析、定点突变和核酸杂交。
③柯斯(Cos)质粒:是一类带有噬菌体DNA粘性末端顺序的质粒DNA分子。是噬菌体-质粒混合物。此类载体分子容量大，可携带45kb的外源DNA片段。也能象一般质粒一样携带小片段DNA，直接转化寄主菌。这类载体常被用来构建高等生物基因文库。