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细胞培养用细胞因子的质量控制与保存方法

更新时间:2025-11-13点击次数:250
   在细胞生物学研究与生物制药领域,细胞培养用细胞因子作为调节细胞生长、分化及功能的关键信号分子,其质量直接决定细胞培养实验的重复性与结果可靠性,而科学的保存方法则是维持其活性的核心保障。因此,建立严格的质量控制体系与规范的保存流程,对推动相关领域研究进展具有重要意义。
 
  细胞因子的质量控制需围绕活性、纯度、稳定性及安全性四大核心指标展开。活性检测是质量控制的核心环节,常用方法包括细胞增殖法与功能分析法。以白细胞介素-2(IL-2)为例,可通过检测其促进CTLL-2细胞增殖的能力,采用MTT比色法或CCK-8法量化细胞活性,确保细胞因子达到实验所需的生物效能。纯度检测则依赖高效液相色谱(HPLC)与SDS-PAGE电泳技术,前者可精准分析目标蛋白含量,后者能直观检测杂蛋白比例,一般要求细胞因子纯度不低于95%,避免杂蛋白干扰细胞信号通路。稳定性评估需模拟不同储存条件(如温度、pH值),通过定期检测活性变化,确定其有效保质期;安全性控制则需排查内毒素污染(采用鲎试剂法)与微生物污染(如细菌、真菌检测),防止污染影响细胞生长或导致实验失败。
 
  科学的保存方法是维持细胞因子活性的关键。未开封的细胞因子需根据其特性选择储存条件:多数重组细胞因子(如TNF-α、EGF)需在**-20℃至-80℃低温环境**下避光保存,避免反复冻融破坏蛋白结构——反复冻融会导致蛋白聚集,显著降低活性。若短期内(1-2周)需频繁使用,可将其溶解后分装至无菌离心管,置于4℃冰箱临时保存,分装体积以单次用量为宜,减少反复取用造成的污染风险。溶解细胞因子时,需使用无内毒素的无菌水或缓冲液(如PBS、培养基),轻柔混匀,避免剧烈振荡;部分脂溶性细胞因子(如某些趋化因子)需加入少量牛血清白蛋白(BSA)提高溶解度,同时保护蛋白活性。
 
  此外,质量控制与保存过程中需注重细节管理:购买细胞因子时应选择正规厂家,核查批次报告中的活性、纯度数据;储存环境需定期监测温度,避免冷冻设备故障导致样本失效;使用前需仔细阅读说明书,严格按照推荐浓度溶解与稀释,避免因操作不当影响实验结果。只有建立系统化的质量控制体系与规范化的保存流程,才能充分发挥细胞因子在细胞培养中的作用,为科研与生产提供可靠保障。
 
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