血清保存注意点

 血清保存注意点

（1）需要长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱,必须预留定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.

　　（2）一般厂商提供的血清无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.

　　（3）瓶装血清解冻需采用逐步解冻法：-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀（小心勿造成气泡）,使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,样因温度改变太,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.

　　（4）热灭活是指56℃, 30分钟加热已*解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分（complement）灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有：细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.

　　（5）切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量.

　　（6）血清中的沉淀物

　　絮状物：主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理.

　　显微镜下"小黑点"：经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,换另一批号的血清.

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