试剂盒反应原理简介：
Cell Counting Kit-8（CCK-8试剂盒）是检测细胞增殖、细胞存活和细胞毒性的试剂盒，是一种基于WST-8的广泛应用快速高灵敏度检测试剂盒，为MTT法的替代方法，试剂盒中采用水溶性四唑盐-WST-8，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan（参考图1）。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈良好线性关系。
WST-8是MTT的一种升级产品，和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。*，MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液（如DMSO等）来溶解；而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤，减少误差。其次，WST-8产生的formazan溶解度远远大于XTT和MTS产生的formazan。第三，WST-8比XTT和MTS更加稳定，使实验结果更加稳定。另外，WST-8和MTT、XTT等相比线性范围更宽，灵敏度更高。远达晶美研制的CCK-8试剂盒全部采用高纯*原料，经过至少35种细胞检测其OD值与细胞数目的线性关系（r2>0.98）且无细胞毒性。
★ 灵检测灵敏度更高，更易溶解，并且更加稳定。★ 操作简便，省时省力
★ 水溶性，不需要换液，尤其适合于悬浮细胞
★ 无需放射性同位素和有机溶剂，对细胞毒性低
★ 酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响
★ 无需预制，即开即用
★ 适合于高通量药物筛选
上海乾思 生物销售部：
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3069954
试剂盒使用说明：
1. 接种细胞悬液于96孔板中，100 µL /孔，每孔细胞数量>1000（如采用其他24/48孔板，培养体系中的溶液量和细胞数目按照比例扩大）。将培养板在培养箱预培养 （在37℃，5% CO2的条件下稳定一夜或>5小时）。
2. 做细胞数目测定实验时，向每孔加入10µL CCK-8溶液（采用24/48孔板，加入CCK-8溶液的量按比例增加，如400µl细胞培养体系中加入40µl CCK-8溶液），本步请注意不要生成气泡，气泡会折光影响O.D值）。
3. 将培养板在培养箱内孵育0.5-4小时（可间歇在酶标仪上测定，选择*的时间点），大部分细胞1-2小时合适（37℃，5% CO2的条件下）。
4. 用酶标仪测定在450 nm处的吸光度（OD值）。
5. 如果暂时不测定O.D值，打算以后测定的话，向每孔中加入1% w/v SDS溶液或 0.1 M HCl溶液10µL，并避光保湿室温条件下无菌保存24-36小时内有效。
Cell Counting Kit-WST-8试剂盒说明书
注意事项：
由于使用96孔板进行检测，如细胞培养时间较长需考虑蒸发的问题。一方面，由于96孔板周围一圈zui容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加PBS，无菌水或培养液；另一方面，可以把孔板置于湿度充分的地方缓解蒸发。
本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应，如果待检测体系中存在较多的还原剂，例如一抗氧化剂会干扰检测，需设法去除后测定。
用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定。
为了您的健康和安全，请穿实验服并戴一次性手套进行上述操作。
保存条件：4℃避光保存一年有效。
Cell Counting Kit-WST-8试剂盒说明书
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